生物選修(xiu)3雖然(ran)并(bing)不(bu)是主要的書本之一，但當(dang)中的知(zhi)識(shi)點(dian)也會有經常(chang)考到的，下(xia)面生物選修(xiu)3知(zhi)識(shi)點(dian)總結(jie)是小編(bian)想跟大(da)家分享(xiang)的，歡迎大(da)家瀏覽。

　　生物選修3知識點總結

　　專題1　基因工程

　　1.1　DNA重組技術的基本工具

　　1.基(ji)(ji)因工程是(shi)在　DNA分子　水平上進行設計施(shi)工的，因此又(you)叫做　DNA重(zhong)組　技(ji)術(shu)(shu)，這種技(ji)術(shu)(shu)是(shi)在生(sheng)(sheng)物體外(wai)，通過(guo)體外(wai)　DNA重(zhong)組　和　轉基(ji)(ji)因　等技(ji)術(shu)(shu)，賦(fu)予生(sheng)(sheng)物新(xin)的遺傳特性。

　　2.基(ji)因操(cao)作的工具(ju)包括基(ji)因的“剪刀(dao)”――　限制性核酸內切酶(mei)　;基(ji)因的“針線”――DNA連接(jie)酶(mei)　;基(ji)因的“運(yun)輸(shu)工具(ju)”――　運(yun)載體　。

　　3.限制酶(mei)主要來(lai)源于　原核(he)生物　。限制酶(mei)的(de)作(zuo)用特(te)點(dian)是能(neng)夠識別DNA中　某(mou)種特(te)定(ding)的(de)核(he)苷(gan)酸(suan)(suan)序(xu)列　，切開兩個　核(he)苷(gan)酸(suan)(suan)　之(zhi)間的(de)　磷(lin)酸(suan)(suan)二(er)酯鍵　。限制酶(mei)切割產生的(de)DNA片(pian)段末端(duan)通(tong)常有兩種形式：　黏性末端(duan)　和　平末端(duan)　。

　　4.DNA連(lian)接(jie)酶(mei)(mei)的(de)作用是(shi)　將雙鏈DNA片(pian)段連(lian)接(jie)起來　，恢復(fu)被限(xian)制酶(mei)(mei)切開的(de)兩個(ge)核苷酸之間的(de)　磷(lin)酸二(er)脂鍵(jian)　。根(gen)據酶(mei)(mei)的(de)來源(yuan)不同，可(ke)以將這些酶(mei)(mei)分(fen)為兩類：　T4DNA連(lian)接(jie)酶(mei)(mei)和　E.coliDNA連(lian)接(jie)酶(mei)(mei)　。

　　5.目前(qian)基因工程(cheng)中經常(chang)使用(yong)的運載體有　質粒　、　動植物(wu)病(bing)毒　和　λ噬菌體的衍(yan)生物(wu)　。

　　6.質粒是(shi)一種　裸露(lu)的　、　結構簡單　、獨立(li)于(yu)　細菌染色體　之外，并具(ju)有　自我(wo)復(fu)制　能力的　雙鏈(lian)環狀　DNA分子。

　　7.作(zuo)為基因(yin)進(jin)入細胞(bao)的(de)載體，必(bi)須具備的(de)條件(jian)是　能在宿主細胞(bao)中復制并穩(wen)定保存　、具有(you)(you)一至多個限制酶切點　、　具有(you)(you)某(mou)些(xie)標(biao)記基因(yin)　、　對宿主的(de)生(sheng)存沒有(you)(you)決(jue)定性(xing)的(de)作(zuo)用。

　　1.2　基因工(gong)程的基本操作程序

　　1.基(ji)因(yin)工(gong)程的(de)基(ji)本操(cao)作程序主要包(bao)括四個步驟：　目的(de)基(ji)因(yin)的(de)獲取　、　基(ji)因(yin)表達載體的(de)構建　、　將目的(de)基(ji)因(yin)導入受體細胞(bao)　、　目的(de)基(ji)因(yin)的(de)檢測與鑒(jian)定(ding)　。

　　2.目的基因(yin)(yin)(yin)主要是指　編碼蛋(dan)白質(zhi)的結(jie)構(gou)基因(yin)(yin)(yin)　，也可以是一些　具有(you)調(diao)控(kong)作用的因(yin)(yin)(yin)子。獲(huo)取(qu)目的基因(yin)(yin)(yin)的途徑有(you)　從基因(yin)(yin)(yin)文庫中(zhong)獲(huo)取(qu)?、　利用PCR技術(shu)擴增獲(huo)得　、　直接人工合(he)成　。

　　3.PCR是利用(yong)　DNA雙鏈(lian)復(fu)制　的原理，將(jiang)基因(yin)的核苷酸序(xu)列加以(yi)復(fu)制，使其(qi)數目呈　指數　方式增加。需要(yao)的前提是　要(yao)有一段已知目的基因(yin)的核苷酸序(xu)列　，擴增的過(guo)程是：目的基因(yin)DNA受熱變性后解鏈(lian)為單鏈(lian)，　引物與單鏈(lian)　相應互補序(xu)列結合(he)，然后在　DNA聚(ju)合(he)酶　的作用(yong)下(xia)進行延伸(shen)，如此重復(fu)循環多次。

　　4.基因工程的(de)核心是　基因表(biao)達載體的(de)構建　，其(qi)目(mu)(mu)的(de)是　使目(mu)(mu)的(de)基因在(zai)受體細胞中穩定存在(zai)，并可(ke)以遺傳給下一代，同時，使目(mu)(mu)的(de)基因能夠(gou)表(biao)達和發揮作用　。

　　5.一個基(ji)因(yin)表達載體的(de)組成有：　目的(de)基(ji)因(yin)　、　啟動子　、　終止子　和(he)　標記基(ji)因(yin)　。

　　6.將目的(de)(de)(de)(de)基(ji)(ji)因導入(ru)(ru)植(zhi)物(wu)細(xi)胞的(de)(de)(de)(de)方法(fa)(fa)(fa)有(you)　農(nong)桿菌轉(zhuan)化法(fa)(fa)(fa)　、　基(ji)(ji)因槍(qiang)法(fa)(fa)(fa)　和　花粉管通道法(fa)(fa)(fa)　。采(cai)用最(zui)多的(de)(de)(de)(de)方法(fa)(fa)(fa)是　農(nong)桿菌轉(zhuan)化法(fa)(fa)(fa)　，通過農(nong)桿菌的(de)(de)(de)(de)轉(zhuan)化作用，就可以使　目的(de)(de)(de)(de)基(ji)(ji)因　進(jin)入(ru)(ru)植(zhi)物(wu)細(xi)胞，并將其插(cha)入(ru)(ru)到植(zhi)物(wu)細(xi)胞中的(de)(de)(de)(de)　染色體(ti)DNA上，使　目的(de)(de)(de)(de)基(ji)(ji)因　的(de)(de)(de)(de)遺傳(chuan)性狀得(de)以穩定維(wei)持(chi)和表達(da)。

　　7.基(ji)因(yin)工(gong)程選取原(yuan)核生物作為受體細胞(bao)的原(yuan)因(yin)是(shi)由于其具有其他生物沒有的一些特點，如　繁殖(zhi)快　、　多為單細胞(bao)　、　遺(yi)傳(chuan)物質相對較少　等

　　8.大腸桿菌(jun)常用的(de)轉化方法(fa)是：先用　Ca2+ 處理(li)細胞(bao)，再將　載體DNA分(fen)子溶于緩沖液中　與此種細胞(bao)混合，在一定的(de)溫度(du)下促進感受(shou)態細胞(bao)吸收DNA分(fen)子，完(wan)成轉化過程。

　　9.檢(jian)測(ce)目(mu)(mu)的(de)基(ji)因(yin)(yin)是否成(cheng)(cheng)功插入到(dao)轉(zhuan)基(ji)因(yin)(yin)生(sheng)物(wu)(wu)的(de)染色體(ti)(ti)(ti)上的(de)方法是采(cai)用(yong)(yong)　DNA分子(zi)雜交(jiao)技術　，此方法使用(yong)(yong)的(de)探針是　同位素標(biao)記的(de)含有目(mu)(mu)的(de)基(ji)因(yin)(yin)的(de)DNA片段(duan)　，與檢(jian)測(ce)目(mu)(mu)的(de)基(ji)因(yin)(yin)是否轉(zhuan)錄出mRNA所用(yong)(yong)的(de)探針　一樣(yang)　。檢(jian)測(ce)目(mu)(mu)的(de)基(ji)因(yin)(yin)是否翻譯成(cheng)(cheng)蛋(dan)白質(zhi)，檢(jian)測(ce)方法是從轉(zhuan)基(ji)因(yin)(yin)生(sheng)物(wu)(wu)體(ti)(ti)(ti)內提取蛋(dan)白質(zhi)，用(yong)(yong)相應的(de)　抗體(ti)(ti)(ti)　進行(xing)　抗原-抗體(ti)(ti)(ti)　雜交(jiao)，若有　雜交(jiao)帶出現(xian)，表明目(mu)(mu)的(de)基(ji)因(yin)(yin)已(yi)形成(cheng)(cheng)蛋(dan)白質(zhi)產品。除了上述的(de)分子(zi)檢(jian)測(ce)外，有時還(huan)需(xu)要進行(xing)　個體(ti)(ti)(ti)生(sheng)物(wu)(wu)學水(shui)平　的(de)鑒定，如對抗蟲植物(wu)(wu)做抗蟲的(de)接(jie)種實驗。

　　1.3　基因工程的應用

　　1.植物(wu)(wu)基因(yin)工程技術主要(yao)用于提高農(nong)作物(wu)(wu)的　抗逆　能力(li)，以及改(gai)良農(nong)作物(wu)(wu)的　品質　和利用植物(wu)(wu)生(sheng)產(chan)　藥物(wu)(wu)　等方面(mian)。

　　2.抗病轉(zhuan)基(ji)因(yin)植(zhi)物(wu)所采用(yong)(yong)的(de)基(ji)因(yin)，使(shi)用(yong)(yong)最多的(de)是　病毒(du)外殼蛋白(bai)基(ji)因(yin)　和　病毒(du)的(de)復制基(ji)因(yin)　;抗真菌(jun)轉(zhuan)基(ji)因(yin)植(zhi)物(wu)中可使(shi)用(yong)(yong)的(de)基(ji)因(yin)有　幾(ji)丁質酶基(ji)因(yin)　和　抗毒(du)素合成基(ji)因(yin)　。

　　3.在培育抗逆轉(zhuan)基(ji)因植(zhi)物(wu)中，使用　調節細胞滲透壓的基(ji)因　來(lai)提(ti)(ti)高農作(zuo)物(wu)的抗鹽堿和抗干旱的能力;將魚的　抗凍(dong)蛋白　基(ji)因導(dao)入(ru)煙草和番茄，提(ti)(ti)高它們的耐寒能力;將　抗除(chu)草劑　基(ji)因導(dao)入(ru)作(zuo)物(wu)，使作(zuo)物(wu)抗除(chu)草劑。

　　4.在利用轉基因(yin)改良植物的品質方面，我國科學家將(jiang)　富含賴(lai)氨(an)酸(suan)的蛋白質編碼基因(yin)　導入玉米，獲(huo)得的轉基因(yin)玉米中(zhong)賴(lai)氨(an)酸(suan)的含量(liang)比對照(zhao)提高30%。

　　5.動物基(ji)因(yin)工程從誕生那天起，就在　動物品種(zhong)改良　、　建立生物反(fan)應器　、　器官移植(zhi)　等很(hen)方面顯(xian)示了(le)廣(guang)闊的(de)前景。

　　6.乳(ru)腺(xian)生(sheng)物反應器的操作過(guo)程為：將(jiang)　藥用蛋白　基因與　乳(ru)腺(xian)蛋白基因的啟(qi)動(dong)子　等(deng)調控組件重組在一(yi)起，通過(guo)　顯微注射　等(deng)方法，導(dao)入哺乳(ru)動(dong)物的　受精卵　中，然后，將(jiang)　受精卵　送入母(mu)體內(nei)，使(shi)其生(sheng)長發育(yu)成轉基因動(dong)物。

　　7.為解決器官(guan)移植中的(de)(de)免疫排(pai)斥(chi)反應(ying)，科學(xue)家正在想辦法(fa)對豬的(de)(de)器官(guan)進行改造，采用(yong)的(de)(de)方法(fa)是　將器官(guan)供體基因(yin)組導入某種調(diao)節因(yin)子，以抑制抗原(yuan)決定基因(yin)的(de)(de)表達　或　設法(fa)除去(qu)抗原(yuan)決定基因(yin)，結合克隆技(ji)術(shu)，培(pei)育出沒有免疫排(pai)斥(chi)反應(ying)的(de)(de)轉基因(yin)克隆豬器官(guan)　。

　　8.基(ji)(ji)因(yin)治療是把　正(zheng)常基(ji)(ji)因(yin)　導(dao)入病人體內使(shi)　該(gai)基(ji)(ji)因(yin)的(de)表(biao)達(da)產物　發揮作用，從而達(da)到治療疾病的(de)目(mu)的(de)。其方法可以分為　體外基(ji)(ji)因(yin)治療　和　體內基(ji)(ji)因(yin)治療　。

　　1.4　蛋白(bai)質工(gong)程的崛起

　　1.蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質工(gong)程(cheng)(cheng)是指以(yi)　蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質分子的(de)(de)(de)結構規律　及其與　生(sheng)物功(gong)能　的(de)(de)(de)關系作為基礎，通(tong)過　基因修飾　或(huo)　基因合成　，對現有蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質進行　改造　，或(huo)制(zhi)造一種　新的(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質　，以(yi)滿(man)足(zu)人們生(sheng)產和生(sheng)活的(de)(de)(de)需求。與基因工(gong)程(cheng)(cheng)合成的(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質的(de)(de)(de)主要區別是　基因工(gong)程(cheng)(cheng)只能合成自然(ran)界已存在(zai)的(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質，而蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質工(gong)程(cheng)(cheng)可(ke)合成一些自然(ran)界中(zhong)原本(ben)不存在(zai)的(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質　。

　　2.玉米中賴氨(an)酸(suan)含量(liang)較低，原因是賴氨(an)酸(suan)合成過程(cheng)中兩種酶――天(tian)冬氨(an)酶激酶和二氫(qing)吡啶二羧酶合成酶的(de)活(huo)性(xing)(xing)受細(xi)胞(bao)內　賴氨(an)酸(suan)濃度　的(de)影(ying)響，當　賴氨(an)酸(suan)達到一定量(liang)　時會抑制(zhi)這(zhe)兩種酶活(huo)性(xing)(xing)。

　　3.蛋白質工程的(de)基(ji)(ji)本途徑中　預(yu)期蛋白質功(gong)能　→　設計蛋白質結構(gou)　→　推測氨(an)基(ji)(ji)酸序列(lie)(lie)　→　找(zhao)出對應的(de)脫氧核苷酸序列(lie)(lie)　。

　　專題2　細胞工程

　　2.1　植物細胞工程

　　2.1.1　植(zhi)物(wu)細胞工程的基本(ben)技(ji)術

　　1.植物的花瓣(ban)屬于　高度分化　的組織，利用它來培育出新(xin)的植株，首選(xuan)要經(jing)過　激(ji)素的誘導，使其　脫(tuo)分化　成為具有分生能力的薄(bo)壁細胞，進而形成　愈(yu)傷　組織。再(zai)經(jing)過一定的條件(jian)培養，又可以　再(zai)分化　出根和芽，形成完整(zheng)的小植株。

　　2.每(mei)(mei)個(ge)植(zhi)物都(dou)具有(you)全能(neng)性(xing)的(de)特點，原因是　每(mei)(mei)個(ge)細胞中都(dou)具有(you)某種生物的(de)全部遺傳信息。

　　3.在植(zhi)(zhi)物(wu)的生(sheng)長發育過程中(zhong)，細胞(bao)并不(bu)會表現出全(quan)能性(xing)，而(er)是分(fen)化成各(ge)種(zhong)　組織(zhi)和器官　，原(yuan)因(yin)是　細胞(bao)中(zhong)的基因(yin)會選擇(ze)性(xing)表達出各(ge)種(zhong)蛋白質(zhi)　，從而(er)構成植(zhi)(zhi)物(wu)的不(bu)同組織(zhi)和器官。

　　4.植物的組織(zhi)培(pei)養(yang)就是在　無菌　和人(ren)工控制(zhi)的條件(jian)下(xia)，將(jiang)　離體　的植物器官、組織(zhi)、細胞，培(pei)養(yang)在人(ren)工配(pei)置的培(pei)養(yang)基上給予適(shi)宜的培(pei)養(yang)條件(jian)，誘(you)導其產生　愈傷(shang)組織(zhi)　、叢芽，最終形(xing)成完整的植株。

　　5.植(zhi)物(wu)組織(zhi)培養(yang)全過程(cheng)，證明了(le)　分化的植(zhi)物(wu)細胞仍(reng)具有形(xing)成完整的植(zhi)物(wu)所(suo)需要(yao)的全部(bu)基因　。

　　6.番(fan)茄和馬鈴薯不能進行傳(chuan)統(tong)的雜交，原因(yin)是(shi)它們(men)(men)是(shi)兩個不同的　物種　，因(yin)此(ci)它們(men)(men)之間想想著天然的　生(sheng)殖隔離　，但(dan)是(shi)，如(ru)果采用　體細(xi)胞雜交　的方法，就能得到“番(fan)茄-馬鈴薯”雜種植(zhi)株，這各方法成功(gong)的關鍵是(shi)：

　　①　利(li)用纖維(wei)素酶和果(guo)膠酶除去細(xi)胞壁(bi)獲得具有(you)活力(li)的(de)原(yuan)生(sheng)質(zhi)(zhi)體(ti)　;②　原(yuan)生(sheng)質(zhi)(zhi)體(ti)融(rong)合　。

　　成功(gong)的標志是　融(rong)合后的雜種細(xi)胞(bao)(bao)再生細(xi)胞(bao)(bao)壁　。

　　7.進行(xing)原生(sheng)質(zhi)體間(jian)的(de)融(rong)合，必須要借助(zhu)一(yi)定的(de)技(ji)術手段(duan)進行(xing)人工誘(you)導。人工誘(you)導的(de)方法(fa)基本可以(yi)分(fen)為兩大類――物(wu)理法(fa)和化(hua)學(xue)(xue)法(fa)，物(wu)理法(fa)包括　離心　、　振動(dong)　、　電(dian)激　等;化(hua)學(xue)(xue)法(fa)一(yi)般使(shi)用(yong)　聚乙二(er)醇(chun)(PEG)　作為誘(you)導劑來誘(you)導細胞融(rong)合。

　　8.植(zhi)物體(ti)(ti)細(xi)胞(bao)雜(za)交就是將(jiang)不同(tong)種(zhong)的(de)植(zhi)物體(ti)(ti)細(xi)胞(bao)，在一定的(de)條件下(xia)融合(he)成　雜(za)種(zhong)細(xi)胞(bao)　，并將(jiang)其培育成　新的(de)植(zhi)物體(ti)(ti)的(de)技術　。植(zhi)物體(ti)(ti)細(xi)胞(bao)融合(he)引起的(de)變異(yi)屬(shu)于　染色體(ti)(ti)變異(yi)　。

　　9.植物(wu)(wu)細(xi)胞工程常(chang)采(cai)用的(de)技術手段有(you)　植物(wu)(wu)組(zu)織(zhi)培養(yang)技術　和(he)　植物(wu)(wu)體細(xi)胞雜交技術　等。

　　2.1.2　植物細(xi)胞工(gong)程的(de)實際應用

　　1.植物的微型繁殖(zhi)技術又稱　快速(su)繁殖(zhi)技術　，其意義是①　可(ke)以保持(chi)優(you)良品種(zhong)的遺傳性(xing)狀　;②　高效快速(su)地實現大量繁殖(zhi)　。

　　2.植物長期進行　營養　生殖，病(bing)(bing)毒(du)會(hui)(hui)在作(zuo)物體內(nei)逐年(nian)積累，結果導致(zhi)作(zuo)物產量降低(di)、品質變差。如果用(yong)　分生區(莖尖)　作(zuo)為組織培(pei)養的材料，就會(hui)(hui)培(pei)育出無(wu)病(bing)(bing)毒(du)的脫(tuo)毒(du)苗，用(yong)脫(tuo)毒(du)苗進行快速繁殖，種植的作(zuo)物就不(bu)會(hui)(hui)或極少感染病(bing)(bing)毒(du)。

　　3.所謂人工種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)子，就(jiu)是以　植(zhi)物組(zu)織培養　得(de)到的(de)胚狀體(ti)、不定芽、頂芽和(he)腋芽等(deng)為材料，經(jing)過　人工薄膜(mo)(mo)　包裝得(de)到種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)子，人工種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)子在適宜的(de)條件下同(tong)樣能夠萌發長成(cheng)幼(you)苗。人工種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)子由(you)　人工種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)皮(pi)(pi)　、膠質和(he)　胚狀體(ti)　三部分(fen)組(zu)成(cheng)，其中的(de)膠質相(xiang)當于單子葉(xie)植(zhi)物種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)子的(de)　胚乳　或雙子葉(xie)植(zhi)物種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)子的(de)　子葉(xie)　。人工種(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)皮(pi)(pi)的(de)制備(bei)是　生(sheng)物膜(mo)(mo)　結構和(he)功能的(de)研究深入(ru)到分(fen)子水平的(de)體(ti)現。

　　4.通過花藥培養(yang)獲得(de)　單(dan)倍體(ti)　，再經過人工誘導(dao)使　染(ran)色體(ti)　加(jia)倍，即可得(de)到穩定遺(yi)傳(chuan)的(de)優(you)良品種。這項技術稱為　單(dan)倍體(ti)育種　，其優(you)點是　明顯縮短(duan)育種年限　。該技術所依據的(de)遺(yi)傳(chuan)學原理是　染(ran)色體(ti)變異　。

　　5.在植物的(de)組織培(pei)(pei)養(yang)過程中，由于培(pei)(pei)養(yang)的(de)細胞一(yi)直(zhi)處于　不斷分生(sheng)　狀(zhuang)態，因此容易(yi)受(shou)到培(pei)(pei)養(yang)條件和外界壓力的(de)影響而產(chan)生(sheng)　突變　，從這些生(sheng)產(chan)突變的(de)個體(ti)中可以篩選出對人們(men)有(you)用的(de)突變體(ti)，進而培(pei)(pei)育成新品種。

　　6.植(zhi)物組織培養技術除(chu)了在(zai)農業上的應用外，還廣泛應用于細(xi)胞產物的工廠(chang)化生產等領域(yu)，可獲(huo)得　蛋白質　、　脂肪　、　糖類　、　藥(yao)物　、　香料　、生物堿等細(xi)胞產物。

　　2.2　動物(wu)細胞(bao)工(gong)程

　　2.2.1　動物細胞培養和核(he)移(yi)植技(ji)術

　　1.動物(wu)(wu)細(xi)胞(bao)工(gong)程常(chang)用的技術手(shou)段有(you)　動物(wu)(wu)細(xi)胞(bao)培養　、　動物(wu)(wu)細(xi)胞(bao)核(he)移植(zhi)　、　動物(wu)(wu)細(xi)胞(bao)融合　、　生(sheng)產單克隆抗體(ti)　等(deng)，其中　動物(wu)(wu)細(xi)胞(bao)培養技術　是其他動物(wu)(wu)細(xi)胞(bao)工(gong)程技術的基礎。

　　2.將從(cong)健(jian)康的(de)動(dong)物(wu)體內(nei)取出(chu)的(de)組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)塊剪碎，加入　胰(yi)蛋白酶(mei)　或　膠原蛋白酶(mei)　處理一(yi)段時間后，組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)塊就(jiu)會(hui)分散成(cheng)單個(ge)細胞(bao)。對動(dong)物(wu)細胞(bao)進行培(pei)(pei)(pei)養時，要求培(pei)(pei)(pei)養皿(min)或培(pei)(pei)(pei)養瓶(ping)內(nei)表(biao)面　光(guang)滑、無毒、易于(yu)貼附　;當貼壁細胞(bao)分裂生(sheng)長到表(biao)面相互(hu)接觸時，細胞(bao)就(jiu)會(hui)　停(ting)止(zhi)分裂增(zeng)殖　，這種現(xian)象稱為(wei)細胞(bao)的(de)　接觸抑制　。人們通常(chang)將動(dong)物(wu)組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)消化后的(de)初次培(pei)(pei)(pei)養稱為(wei)　原代培(pei)(pei)(pei)養　。

　　3.貼滿(man)瓶壁的(de)細(xi)胞(bao)需要重新(xin)用　胰蛋白酶　處理(li)，然后分瓶繼續(xu)培養，讓細(xi)胞(bao)繼續(xu)增殖，這樣的(de)培養稱為　傳(chuan)代培養　。細(xi)胞(bao)傳(chuan)代至10代～50代左右時(shi)，增殖會逐漸減慢，以至于完全停止，但少部分細(xi)胞(bao)會克(ke)服壽命的(de)極限，獲得不死性，這些細(xi)胞(bao)已經發(fa)生了突變，正(zheng)在朝著(zhu)等同于癌(ai)細(xi)胞(bao)的(de)方(fang)向(xiang)發(fa)展。

　　4.動(dong)物(wu)細胞培養(yang)的條件包括(kuo)　無(wu)菌、無(wu)毒的環境(jing)　，　營養(yang)　，　溫度和(he)pH，　氣(qi)體環境(jing)　。

　　5.動物核移(yi)植是將(jiang)動物的(de)(de)一個(ge)細(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)　細(xi)胞(bao)(bao)核　移(yi)入一個(ge)已(yi)經(jing)去(qu)掉(diao)　細(xi)胞(bao)(bao)核　的(de)(de)　卵(luan)母細(xi)胞(bao)(bao)　中，使(shi)其(qi)重組并發(fa)育成一個(ge)新(xin)的(de)(de)　胚胎　，這個(ge)胚胎最(zui)終發(fa)育成為動物個(ge)體。

　　6.用(yong)(yong)于核(he)移植(zhi)的(de)(de)供(gong)體(ti)細(xi)(xi)(xi)胞一(yi)般都選用(yong)(yong)傳(chuan)代　10代　以內的(de)(de)細(xi)(xi)(xi)胞，因(yin)為這樣(yang)的(de)(de)細(xi)(xi)(xi)胞能(neng)保(bao)持正(zheng)常的(de)(de)二倍體(ti)核(he)型(xing)。通過細(xi)(xi)(xi)胞核(he)移植(zhi)方法生(sheng)產的(de)(de)克隆動物(wu)，并(bing)不是對核(he)供(gong)體(ti)動物(wu)100%的(de)(de)復(fu)制，因(yin)為生(sheng)物(wu)的(de)(de)性(xing)狀除受　細(xi)(xi)(xi)胞核(he)基因(yin)　控制以外(wai)，還受　細(xi)(xi)(xi)胞質基因(yin)　和　外(wai)界環境　的(de)(de)影響。

　　7.體細胞核移植技術的應用前景(jing)有：　促進優(you)良畜群繁育　;　保護瀕危動物　;　克(ke)隆人的細胞、組(zu)織、器官，進行器官移植　等。

　　2.2.2　動物細胞(bao)融合與(yu)單克隆抗體(ti)

　　1.動物細(xi)胞融(rong)合常用的(de)誘導因素有(you)　聚(ju)乙二(er)醇(chun)(PEG)　、　滅活病毒(du)　、　電激　等。細(xi)胞融(rong)合技(ji)術的(de)優點是　突(tu)破(po)了(le)有(you)性雜交方法的(de)局限(xian)，使遠緣(yuan)雜交成(cheng)為可能　。

　　2.制備(bei)單(dan)克隆(long)抗體(ti)的(de)(de)(de)(de)(de)技術流(liu)程是(shi)：用羊(yang)的(de)(de)(de)(de)(de)紅細(xi)(xi)(xi)胞(bao)對小(xiao)鼠進行(xing)注(zhu)射，使(shi)小(xiao)鼠產(chan)生　免疫　反(fan)應(ying)。然(ran)后(hou)，把　相(xiang)應(ying)的(de)(de)(de)(de)(de)B淋巴(ba)　細(xi)(xi)(xi)胞(bao)和　骨(gu)髓瘤(liu)　細(xi)(xi)(xi)胞(bao)融(rong)(rong)合(he)，再(zai)用　特定的(de)(de)(de)(de)(de)選(xuan)(xuan)擇性培(pei)(pei)養(yang)基　進行(xing)篩(shai)選(xuan)(xuan)，在該培(pei)(pei)養(yang)基上，　未(wei)融(rong)(rong)合(he)的(de)(de)(de)(de)(de)親本　細(xi)(xi)(xi)胞(bao)和　融(rong)(rong)合(he)的(de)(de)(de)(de)(de)具(ju)有同一(yi)(yi)種核的(de)(de)(de)(de)(de)　細(xi)(xi)(xi)胞(bao)都會死(si)亡，只有　融(rong)(rong)合(he)的(de)(de)(de)(de)(de)雜(za)種　細(xi)(xi)(xi)胞(bao)才能(neng)(neng)生長(chang)。這種雜(za)種細(xi)(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)(de)(de)(de)特點(dian)是(shi)既能(neng)(neng)　迅速大量繁殖　又能(neng)(neng)　產(chan)生專一(yi)(yi)性的(de)(de)(de)(de)(de)抗體(ti)　。對上述經(jing)選(xuan)(xuan)擇性培(pei)(pei)養(yang)的(de)(de)(de)(de)(de)雜(za)交瘤(liu)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)，還需進行(xing)　克隆(long)化培(pei)(pei)養(yang)　和　抗體(ti)檢測　，經(jing)過(guo)多次篩(shai)選(xuan)(xuan)，就(jiu)可獲得足(zu)夠數(shu)量的(de)(de)(de)(de)(de)能(neng)(neng)分泌所需抗體(ti)的(de)(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)。最后(hou)，將(jiang)雜(za)交瘤(liu)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)在　體(ti)外　條件下做大規模培(pei)(pei)養(yang)，或注(zhu)射到小(xiao)鼠的(de)(de)(de)(de)(de)　腹腔　內增(zeng)殖，這樣，從　細(xi)(xi)(xi)胞(bao)培(pei)(pei)養(yang)液　或　小(xiao)鼠腹腔　中，就(jiu)可以提取大量的(de)(de)(de)(de)(de)單(dan)克隆(long)抗體(ti)了。

　　3.單克隆抗體最(zui)主要的(de)優(you)點是　特(te)異性強(qiang)　、　靈敏度(du)高　和　可大量(liang)制(zhi)備　。

　　4.如果(guo)把抗癌(ai)(ai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)的單克隆(long)抗體(ti)跟　放射性(xing)同位(wei)素(su)　、　化學(xue)藥物(wu)　或　細(xi)(xi)(xi)胞(bao)毒(du)素(su)　相(xiang)結合，制成“生物(wu)導(dao)彈(dan)”注入體(ti)內，借助單克隆(long)抗體(ti)的導(dao)向作用，能將藥物(wu)定向帶到癌(ai)(ai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)所在(zai)位(wei)置，在(zai)原位(wei)殺死癌(ai)(ai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)。這(zhe)樣既不損傷正常細(xi)(xi)(xi)胞(bao)，又減少了用藥劑量。

　　專題3　胚胎工程

　　3.1　體內(nei)受精和早(zao)期胚胎發育

　　1.胚胎(tai)(tai)(tai)(tai)工程是指對動物　早期(qi)胚胎(tai)(tai)(tai)(tai)　或　配子　所進行的多種顯微操作和(he)處(chu)理(li)技術，如　胚胎(tai)(tai)(tai)(tai)移(yi)植(zhi)　、　體外(wai)受(shou)精　、　胚胎(tai)(tai)(tai)(tai)分(fen)割　、　胚胎(tai)(tai)(tai)(tai)干(gan)細胞培養　等(deng)技術。

　　2.哺乳動物精子(zi)的發生(sheng)是在雄性動物的　睪丸(wan)　內完成的。

　　3.哺乳動物(wu)的(de)成(cheng)熟精(jing)子(zi)分為(wei)　頭　、　頸(jing)　和(he)　尾(wei)　三部(bu)分。其(qi)中　頭部(bu)　主要由一(yi)個細胞(bao)核構成(cheng)，　高(gao)爾基(ji)體(ti)(ti)　發育成(cheng)頂(ding)體(ti)(ti)，　中心(xin)體(ti)(ti)　演變成(cheng)尾(wei)，　線(xian)粒體(ti)(ti)　聚(ju)集在(zai)尾(wei)的(de)基(ji)部(bu)形成(cheng)鞘膜，細胞(bao)內的(de)其(qi)他(ta)物(wu)質(zhi)濃縮為(wei)球(qiu)狀(zhuang)，叫(jiao)做　原生(sheng)質(zhi)滴　。

　　4.哺乳動(dong)物(wu)卵(luan)(luan)(luan)子(zi)(zi)的(de)發生(sheng)是(shi)在雌性動(dong)物(wu)的(de)　卵(luan)(luan)(luan)巢(chao)　內完(wan)成(cheng)的(de)。卵(luan)(luan)(luan)母細(xi)胞的(de)減(jian)數第一次(ci)分(fen)裂(lie)(lie)是(shi)在雌性動(dong)物(wu)　排卵(luan)(luan)(luan)　前后完(wan)成(cheng)的(de)，其結果是(shi)產生(sheng)一個　次(ci)級(ji)卵(luan)(luan)(luan)母細(xi)胞　和(he)　第一極(ji)體(ti)　，進入　輸(shu)卵(luan)(luan)(luan)管　，準備(bei)與精子(zi)(zi)受精。減(jian)數第二次(ci)分(fen)裂(lie)(lie)是(shi)在　精子(zi)(zi)和(he)卵(luan)(luan)(luan)子(zi)(zi)結合　的(de)過(guo)程中完(wan)成(cheng)的(de)，次(ci)級(ji)卵(luan)(luan)(luan)母細(xi)胞經(jing)分(fen)裂(lie)(lie)產生(sheng)一個　成(cheng)熟的(de)卵(luan)(luan)(luan)子(zi)(zi)　和(he)　第二極(ji)體(ti)　。在卵(luan)(luan)(luan)黃膜和(he)透明帶的(de)間(jian)隙可以(yi)觀察到兩個　極(ji)體(ti)　時，說(shuo)明卵(luan)(luan)(luan)子(zi)(zi)已(yi)經(jing)完(wan)成(cheng)了受精。

　　5.受精是(shi)指　精子　與(yu)　卵子　結合成(cheng)　合子(受精卵)　的過程，受精是(shi)在　輸卵管　內完成(cheng)的。

　　6.哺乳動物的受精過程(cheng)主要(yao)包括：精子(zi)穿越　放射冠　和(he)　透明帶　，進(jin)入(ru)卵黃(huang)膜，　原核　形(xing)成和(he)　配子(zi)　結合。

　　7.獲能后的(de)(de)精(jing)子(zi)(zi)(zi)與卵(luan)子(zi)(zi)(zi)相(xiang)遇(yu)時，首(shou)先發生　頂體(ti)　反應，使　頂體(ti)　內的(de)(de)酶釋放出來(lai)，溶解卵(luan)丘(qiu)細胞之(zhi)間(jian)的(de)(de)物質，形成精(jing)子(zi)(zi)(zi)穿越　放射冠　的(de)(de)通道。隨后精(jing)子(zi)(zi)(zi)與　透(tou)明(ming)帶　接(jie)觸(chu)(chu)，再將　透(tou)明(ming)帶　溶出一條孔道，精(jing)子(zi)(zi)(zi)借自身的(de)(de)運動(dong)穿越　透(tou)明(ming)帶　，并接(jie)觸(chu)(chu)卵(luan)黃膜(mo)(mo)。在精(jing)子(zi)(zi)(zi)觸(chu)(chu)及卵(luan)黃膜(mo)(mo)的(de)(de)瞬間(jian)，會產生　透(tou)明(ming)帶　反應，防止多個(ge)精(jing)子(zi)(zi)(zi)進入卵(luan)內，這種生理反應稱作(zuo)　卵(luan)黃膜(mo)(mo)封閉　作(zuo)用。

　　8.精子(zi)進入(ru)卵(luan)子(zi)后發生的變(bian)化，首(shou)先是(shi)　尾(wei)部　脫離，并且原有的　核(he)膜(mo)　破(po)裂;隨(sui)后，精子(zi)形成(cheng)(cheng)一個新的　核(he)膜(mo)　;最后形成(cheng)(cheng)一個比(bi)原來精子(zi)核(he)還要大的核(he)，叫(jiao)　雄原核(he)　。與此同時(shi)，卵(luan)子(zi)完成(cheng)(cheng)　減數第二(er)次　分裂，排出　第二(er)極體　后，形成(cheng)(cheng)　雌原核(he)　。

　　9.胚胎(tai)發育的(de)早期(qi)(qi)有(you)一(yi)段時間是在透明帶內進行的(de)，這一(yi)時期(qi)(qi)稱為　卵裂　期(qi)(qi)。其特點(dian)是：細胞分(fen)裂方式為　有(you)絲分(fen)裂　，細胞的(de)數量　增加(jia)　，每(mei)個(ge)細胞的(de)體積　減小　，胚胎(tai)的(de)總體積　不增加(jia)　。

　　10.根據(ju)胚(pei)胎形態的(de)變(bian)化，可(ke)將早期(qi)發育的(de)胚(pei)胎為　桑椹胚(pei)　、　囊胚(pei)　、　原腸胚(pei)　三個時(shi)期(qi)。細胞開始出(chu)現分(fen)化的(de)時(shi)期(qi)是　囊胚(pei)　。

　　11.在原(yuan)腸(chang)胚(pei)(pei)時期，內細胞團(tuan)表層的(de)細胞形成　外胚(pei)(pei)層　，下方的(de)細胞形成　內胚(pei)(pei)層　。滋(zi)養(yang)層則發育為(wei)胎(tai)兒的(de)　胎(tai)膜　和(he)　胎(tai)盤(pan)　。由(you)內胚(pei)(pei)層包圍的(de)囊(nang)腔叫　原(yuan)腸(chang)腔　。

　　3.2　體外受精(jing)和早期胚胎培養

　　1.試管動物技術是指通過(guo)人工操作(zuo)使　卵子(zi)(zi)　和　精(jing)子(zi)(zi)　在(zai)　體外　條件下成熟和受精(jing)，并通過(guo)培養發育為　早(zao)期胚胎　后(hou)，再經(jing)　移(yi)植　產生(sheng)后(hou)代(dai)的技術。

　　2.對于小(xiao)型家畜，卵(luan)母細胞的(de)采集采用的(de)主要方法是：用　促性腺激素(su)　處理，使其排出更多的(de)卵(luan)子，然后從　輸卵(luan)管　中取(qu)出卵(luan)子，直接與獲能的(de)　精(jing)子　在體外受精(jing)。

　　3.對于大型家畜，卵(luan)母(mu)細(xi)(xi)胞(bao)的(de)采(cai)集采(cai)用(yong)的(de)主要(yao)方法是：從屠宰(zai)場已經屠宰(zai)的(de)母(mu)畜的(de)卵(luan)巢中(zhong)采(cai)集　卵(luan)母(mu)細(xi)(xi)胞(bao)　，也可以(yi)借助超聲波(bo)探測儀、內窺鏡或腹腔鏡等工具(ju)，直(zhi)接(jie)從活體動物的(de)卵(luan)巢中(zhong)吸(xi)取　卵(luan)母(mu)細(xi)(xi)胞(bao)　。

　　4.收集精子(zi)的方法(fa)有(you)　假陰道(dao)法(fa)　、　手握法(fa)　和　電刺(ci)激法(fa)　。

　　5.通(tong)常采用的精子(zi)體(ti)外獲(huo)能的方法(fa)有　培養法(fa)　和　化學(xue)誘導法(fa)　。

　　3.3　胚(pei)胎工程(cheng)的應用及前景

　　1.胚(pei)(pei)胎(tai)(tai)移植是指將雌性(xing)(xing)動物的(de)早(zao)期胚(pei)(pei)胎(tai)(tai)，或者通過　體(ti)外受(shou)精　及(ji)其(qi)他(ta)方式得到的(de)胚(pei)(pei)胎(tai)(tai)移植到　同種　的(de)、　生理狀態　相同的(de)其(qi)他(ta)雌性(xing)(xing)動物體(ti)內(nei)，使之(zhi)繼(ji)續(xu)發育成為新個(ge)體(ti)的(de)技術(shu)。其(qi)中提供(gong)胚(pei)(pei)胎(tai)(tai)的(de)個(ge)體(ti)稱(cheng)(cheng)為　供(gong)體(ti)　，接受(shou)胚(pei)(pei)胎(tai)(tai)的(de)個(ge)體(ti)稱(cheng)(cheng)為　受(shou)體(ti)　。

　　2.胚胎移(yi)植的生理(li)學基礎：

　　①供、受體(ti)生(sheng)殖器官的　生(sheng)理變化(hua)　是相同的，為供體(ti)的胚(pei)胎移入受體(ti)提供了相同的生(sheng)理環(huan)境。

　　②哺乳動物的早(zao)期胚胎形成后，在一定(ding)時間內不會與母(mu)體子宮建立　組織　上的聯系，而處于　游離(li)狀(zhuang)態　，這(zhe)就為胚胎的收集提供了可能。

　　③受(shou)體(ti)對移入子宮的外(wai)來胚胎基本(ben)上不(bu)發生　免疫排斥　反應，這為胚胎在受(shou)體(ti)子宮內的存活提供(gong)了可能。

　　④供體胚(pei)胎可與(yu)受體子宮建立正常的(de)　生理　和　組織　上的(de)聯系，且移入受體的(de)供體胚(pei)胎的(de)　遺傳(chuan)特性　在孕育過程中(zhong)不受任何(he)影響。

　　3.胚胎移(yi)植(zhi)主要包括對供、受體的(de)　選擇和(he)處理　，配(pei)種或　進行人工授精　，對胚胎的(de)收集、檢查、培養或保存，對胚胎進行　移(yi)植(zhi)　以及　檢查　等步(bu)驟。

　　4.胚胎(tai)分割是指采用　機械　方法將早(zao)期胚胎(tai)切割成2等份、4等份、8等份等，經移植獲得　同卵雙胎(tai)　或　多胎(tai)　的(de)技術。

　　5.在進(jin)行(xing)胚(pei)胎分割時，應(ying)選擇發育良好、形態正常的(de)　桑椹胚(pei)　或(huo)　囊(nang)胚(pei)　。在對(dui)囊(nang)胚(pei)階段的(de)胚(pei)胎進(jin)行(xing)分割時，要(yao)注意將內細胞團(tuan)　均等(deng)分割　。

　　6.胚(pei)胎分割的局限性：　同卵(luan)分割成(cheng)功的比例很(hen)小，難以(yi)做到均等分割　。

　　7.哺(bu)乳動物的(de)胚胎干細(xi)胞是從　早(zao)期(qi)胚胎　或　原始性腺　中分(fen)(fen)離出來的(de)一類細(xi)胞。在(zai)形態上(shang)，表(biao)現為(wei)　體(ti)積　小、　細(xi)胞核　大、　核仁　明顯;在(zai)功能上(shang)，具有發(fa)育(yu)的(de)　全(quan)能　性，即可分(fen)(fen)化為(wei)成年動物體(ti)內的(de)任何一種組織(zhi)細(xi)胞。

　　8.胚(pei)胎干細(xi)胞(bao)可以(yi)用于治療人(ren)類的(de)某些(xie)頑癥;培育出　人(ren)造組(zu)織器(qi)官(guan)　;揭示(shi)　細(xi)胞(bao)分化　和　細(xi)胞(bao)凋亡　的(de)機理。